آفلاتوکسین‌ها شناخته‌شده‌ترین گروه مایکوتوکسین‌ها هستند که به‌عنوان متابولیت‌های ثانویه توسط قارچ‌ها، عمدتاً توسط Aspergillus parasiticus و Aspergillus flavus، و همچنین به میزان کمتری توسط سویه‌های دیگر تولید می‌شوند. این منشاء همچنین جایی است که نام سم آسپرژیلوس فلاووس از آن گرفته شده است.

تولید آفلاتوکسین بر روی محصولات کشاورزی در مزرعه و یا در زمان نگهداری محصولات کشاورزی به ویژه در شرایط رطوبت بالا و گرم امکان پذیر است. این مواد متأسفانه می توانند برای مدت طولانی حتی پس از کشته شدن قارچ ها باقی بمانند و در نتیجه غذاها را آلوده کنند.

بیشتر مایکوتوکسین ها ترکیبات پایداری هستند که در طی پخت و پز یا فرآوری غذا از بین نمی روند. با وجود مقادیر زیاد آفلاتوکسین، تنها تعداد محدودی در عمل (تحلیلی) قابل توجه است.

آفلاتوکسین B₁ بسیار گسترده است و در محصولات غذایی و خوراکی مانند پنبه دانه، ذرت و بادام زمینی وجود دارد. این ماده بسیار سمی است و توسط سازمان جهانی بهداشت به عنوان سرطان‌زای گروه 1 طبقه‌بندی شده است. آفلاتوکسین های B2، G1، و G2 معمولاً همراه B غلظت های کمتر در نمونه های آلوده یافت می شوند.ترتیب سمیت AFB1 > AFG1 > AFB2 > AFG2 است.

اکراتوکسین A ) OTA ) یک مایکوتوکسین است که از گونه های مختلف آسپرژیلوس و پنی سیلیوم تشکیل شده است. OTA می تواند در طول رشد گیاه تولید شود، اما اغلب در طی تبدیل و ذخیره سازی مواد غذایی ایجاد می شود.دئوکسی نیوالنول (DON) یکی از انواع مایکوتوکسین است که توسط گونه‌های خاص فوزاریوم ایجاد می‌شود که اغلب برنج، جو، جو، گندم، ذرت و غلات مختلف را در حین نگهداری یا در مزرعه آلوده می‌کند.

انسان در معرض خطر قرار گرفتن به طور غیر مستقیم از طریق مواد غذایی با منشاء حیوانی (تخم مرغ، شیر، جگر، کلیه) یا مستقیماً از طریق غذاهای با منشاء گیاهی (غلات) است. این ماده در تریتیکاله، سورگوم، گندم سیاه و سایر محصولات غذایی مانند آبجو، مالت، پنکیک، ذرت بو داده، غذاهای مخصوص نوزادان، رشته فرنگی، غلات صبحانه، نان و آرد یافت شده است.

DON بر سلامت انسان و حیوان تأثیر می گذارد و باعث سرگیجه، سردرد، درد شکم، اسهال، استفراغ، حالت تهوع موقت حاد و تب می شود.Zearalenone (ZON) یک مایکوتوکسین است که متعلق به جنس Fusarium است و عمدتاً در غذا و خوراک تولید می شود. توسعه روش‌های تحلیلی مؤثر برای شناسایی و تعیین کمیت بسیار مهم است، زیرا مایکوتوکسین‌ها می‌توانند به راحتی وارد بازار شوند و سلامت عمومی را به خطر بیندازند. این روش ها در مقیاس وسیع توسط موسسات دولتی و سازمان های حفاظت از سلامت برای نظارت بر خوراک دام تجاری و محصولات غذایی استفاده می شود. در صنعت فرآوری خوب از همین روش ها برای بررسی مواد خام و محصولات استفاده می شود تا آنها را به کشورهای دارای قوانین مناسب هدایت کنند.

                                                              شکل 1.ساختار شیمیایی آفلاتوکسین های تعیین شده

کشورهای سراسر جهان وجود آفلاتوکسین B را در طیف گسترده ای از غذاهای فرآوری نشده و فرآوری شده کنترل می کنندB1،B2،G2،G1نمودار 1 به طور مثال محدودیت‌های عملی تعیین شده توسط سازمان غذا و داروی ایالات متحده را نشان می‌دهد (سطوحی که FDA اقدامات قانونی را برای حذف محصولات از بازار انجام می‌دهد). نمودارهای 2 تا 5 محدودیت‌های ZON، OTA، DON و حداکثر سطوح آفلاتوکسین را نشان می‌دهند که توسط کمیسیون اروپا مطابق با مقررات EG 1881/2006 تعیین شده است.

نمودار 1.سطوح عمل FDA برای آفلاتوکسین در مواد غذایی انسان، خوراک دام و مواد تشکیل دهنده خوراک دام

نمودار 2.حداکثر سطوح DON در مواد غذایی توسط کمیسیون اروپا تعیین شده است

نمودار 3.حداکثر سطوح برای آلاینده های خاص در مواد غذایی توسط کمیسیون اروپا تعیین شده است

نمودار 4.حداکثر سطوح OTA در مواد غذایی توسط کمیسیون اروپا تعیین شده است

نمودار 5.حداکثر سطوح برای ZON در مواد غذایی توسط کمیسیون اروپا تعیین شده است

نظری: آماده سازی نمونه توصیه شده

علاوه بر روش نمونه برداری و آسیاب، روش سنتی برای آنالیز آفلاتوکسین شامل مرحله استخراج، پاکسازی نمونه با استفاده از استخراج فاز جامد (SPE) از طریق کروماتوگرافی مایع با کارایی بالا (HPLC) است. با این حال، این تکنیک به دلیل زمان‌بر بودن مراحل استخراج و پاک‌سازی، ظرفیت نمونه را محدود می‌کند. شکل 2 مروری بر مراحل کلی به کار رفته در آنالیز آفلاتوکسین ارائه می دهد.

برای مشاهده انواع دستگاه HPLC برای آنالیز سموم می توانید بر روی اینجا کلیک فرمائید

                                                           شکل 2.روش تجزیه و تحلیل عمومی برای تعیین آفلاتوکسین

پارامترهای روش

آفلاتوکسین B1,G1 تشخیص آنها دشوار است زیرا آنها فقط حداقل فلورسانس را نشان می دهند. تابش مخلوط آفلاتوکسین با نور UV 254 نانومتر، آفلاتوکسین B1 و G1 هیدروکسیلاسیون ناشی از عکس را طی می کنند و سپس از طریق طیف سنجی فلورسانس با حساسیت بیشتری اندازه گیری می شوند.

نتایج

کروماتوگرام FLD  پس از مشتق سازی ستون  از راکتور UVE ​​در شکل 3 نشان داده شده است. شکل 4 کروماتوگرام DAD را برای همان اجرا که در آن DON شناسایی شده است نشان می دهد. جداسازی روی ستون Eurospher II 100-3 C18 به خوبی کار می کند. قله ها از هم جدا شده اند و همچنین شکل خوبی از خود نشان می دهند.

                    شکل 3.1 کروماتوگرام FLD برای آنالیز مایکوتوکسین با استفاده از راکتور فتوشیمیایی UVE برای مشتق سازی پس از ستون

شکل 4.کروماتوگرام DAD در 220 نانومتر برای آنالیز مایکوتوکسین با استفاده از راکتور فتوشیمیایی UVE برای مشتق‌سازی پس از ستون

نتیجه

DON، ZON و 4 آفلاتوکسین B1،B2,G1,G2 یک مرحله کروماتوگرافی با استفاده از راکتور فتوشیمیایی UVE برای مشتق‌سازی پس از ستون همراه با ستون Eurospher II C18 و سیستم HPLC تحلیلی آزورا توضیح بیشتر در مورد تعیین OTA ضروری است.

تجزیه و تحلیل مواد دیگر تحت تأثیر قرار نمی‌گیرد، زیرا فاز متحرک برای این روش مشتق‌سازی ستونی تغییر نمی‌کند. راکتور فتوشیمیایی به راحتی اداره می شد زیرا مواد شیمیایی اضافی برای مشتق سازی مورد نیاز نبود. این نرم افزار یک جایگزین ساده برای تعیین مایکوتوکسین ها ارائه می دهد.

ویژگی های فیزیکی ستون پیشنهادی

جهت کسب اطلاعات بیشتر با شرکت شناسا پرتوژن در ارتباط باشید.

۰۲۱-۲۲۹۱۹۴۷۴
۰۲۱-۲۲۹۱۹۷۲۰