انواع ستون های جداسازی دستگاه HPLC (کروماتوگرافی مایع) و کاربرد آنها

پرتوژن ۱۴۰۲/۰۳/۰۸
انواع ستون دستگاه HPLC

مقدمه:
در دستگاه HPLC، ستون جداسازی یکی از مهم‌ترین اجزای دستگاه است که برای جداسازی مخلوط ترکیبات شیمیایی در نمونه استفاده می‌شود. در این ستون‌ها، ترکیبات شیمیایی از هم جدا می‌شوند و به‌صورت ترکیبات خالص جدا می‌شوند. ستون‌ها در دستگاه HPLC به‌صورت عمودی قرار می‌گیرند و ترکیبات شیمیایی از طریق المان‌های حمل‌کننده به داخل ستون جداسازی شده و پس از جداسازی، به‌صورت یک جریان خروجی از دستگاه خارج می‌شوند.

انواع ستون‌های جداسازی در دستگاه HPLC عبارتند از:

1. ستون‌های C18: این ستون‌ها از پایه‌های سیلیکا یا پلیمری تشکیل شده‌اند و به‌عنوان ستون‌های استاندارد در HPLC مورد استفاده قرار می‌گیرند. این ستون‌ها برای جداسازی ترکیبات آلی، اسیدی، بازی و نیز برای تحلیل داروها و ترکیبات طبیعی مناسب هستند.
2. ستون‌های C8: این ستون‌ها شباهت زیادی به ستون‌های C18 دارند، با این تفاوت که زنجیره‌های هیدروکربنی آنها کوتاه‌تر هستند. ستون‌های C8 برای جداسازی ترکیبات آلی کوتاه و کم وزن مانند داروها، آمین‌ها و پپتیدها مناسب هستند.
3. ستون‌های C4: این ستون‌ها دارای زنجیره‌های هیدروکربنی کوتاه‌تر از ستون‌های C8 و C18 هستند و برای جداسازی کوتاه‌ترین ترکیبات از جمله آمین‌ها، پپتیدها و کوتاه‌ترین متابولیت‌های دارویی مناسب هستند.
4. ستون‌های فاز معکوس (Reverse Phase): در این ستون‌ها، ترکیبات برای جداسازی به داخل فاز معکوس ستون فرستاده می‌شوند، به‌عنوان مثال، ستون‌های فاز معکوسC18 برای جداسازی ترکیبات هیدروفیلیک مناسب هستند.
5. ستون‌های normal phase: در این ستون‌ها، فاز استاندارد سیلیکا یا آلومینا استفاده می‌شود و برای جداسازی ترکیبات هیدروفوبیک مناسب هستند.
6. ستون‌های Ion exchange: در این ستون‌ها، ترکیبات بر اساس بار الکتریکی خود جداسازی می‌شوند. این ستون‌ها برای جداسازی یون‌ها و ترکیبات شیمیایی با بار الکتریکی مورد استفاده قرار می‌گیرند.
7. ستون‌های Affinity: در این ستون‌ها، جداسازی بر اساس تعاملات بین مولکول‌های هدف و مولکول‌های ثابت روی ستون انجام می‌شود. این ستون‌ها برای جداسازی ترکیبات با تعاملات خاص مانند آنتی بادی‌ها، پروتئین‌ها و DNA مناسب هستند.
8. ستون‌های Chiral: در این ستون‌ها، ترکیبات بر اساس ایزومری‌های خود جداسازی می‌شوند. این ستون‌ها برای جداسازی ایزومر‌های راست‌گرای یا چپ‌گرای ترکیبات شیمیایی مانند آمین‌ها، کربوهیدرات‌ها و داروهای ترکیبی مناسب هستند.

9. ستون‌های فنولی (Phenyl): این ستون‌ها دارای گروه فنیل هستند که به سیلیکا یا پلیمر چسبیده‌اند. این ستون‌ها برای جداسازی ترکیبات آروماتیک، عطر و ادویه‌ها و همچنین برای تحلیل کوتاه‌ترین روغن‌های طبیعی مانند گل‌آذین و بادام مناسب هستند.

مشاهده
عیب یابی و نگهداری سیستم های جذب اتمی قسمت 2B- بهینه سازی شعله

10. ستون‌های آمینی (Amino): این ستون‌ها دارای گروه‌های آمینی هستند که به سیلیکا یا پلیمر چسبیده‌اند. این ستون‌ها برای جداسازی ترکیبات آلی، آمین‌ها، پپتیدها و همچنین برای تحلیل داروهای دیگر مانند آنتی‌بیوتیک‌ها، ویتامین‌ها و هورمون‌ها مناسب هستند.

11. ستون‌های سیلیکا (Silica): در این ستون‌ها فاز ستون از سیلیکا تشکیل شده است. ستون‌های سیلیکا برای جداسازی ترکیبات چند حلقوی، فلاونوئیدها، کربوهیدرات‌ها و همچنین برای تحلیل داروهای ترکیبی و طبیعی مناسب هستند.

12. ستون‌های سلولوز (Cellulose): این ستون‌ها دارای فاز سلولوزی هستند که به سیلیکا یا پلیمر چسبیده‌اند. این ستون‌ها برای جداسازی ترکیبات چربی، اسیدها، بازهای آلی و همچنین برای تحلیل کربوهیدرات‌ها، پپتیدها و همچنین داروهای ترکیبی و طبیعی مناسب هستند.

13. ستون‌های سولوبیل (Solubility): در این ستون‌ها فاز ستون از پلیمری تشکیل شده است که قابلیت حل در محلول‌های آبی و آلی را دارد. این ستون‌ها برای جداسازی ترکیبات با قابلیت حل در محلول‌های آبی و آلی مناسب هستند.

14.ستون‌های فاز معکوس آنیونی (Anion Exchange): در این ستون‌ها، ترکیبات بر اساس بار الکتریکی منفی خود جداسازی می‌شوند. این ستون‌ها برای جداسازی یون‌های منفی و ترکیبات شیمیایی با بار الکتریکی منفی مانند اسیدها، سولفونات‌ها و فسفات‌ها مناسب هستند.

15. ستون‌های فاز معکوس کاتیونی (Cation Exchange): در این ستون‌ها، ترکیبات بر اساس بار الکتریکی مثبت خود جداسازی می‌شوند. این ستون‌ها برای جداسازی یون‌های مثبت و ترکیبات شیمیایی با بار الکتریکی مثبت مانند آمین‌ها، آمینواسیدها و آلکالوئیدها مناسب هستند.

 

جهت مشاهده فروشگاه ستون و قطعات دستگاه HPLC لطفا کلیک فرمایید.

 

لیست ستون‌های USP L برای دستگاه HPLC به شرح زیر است:

1. L1: Octadecyl silane (ODS) or C18
2. L3: Cyano-alkyl silane
3. L7: Phenyl-hexyl
4. L8: 4-(4-Phenybutyl)phenyl
5. L9: Biphenyl
6. L10: Diol
7. L11: Amino
8. L12: Cyano
9. L13: Silica
10. L14: Pentafluorophenyl
11. L20: Phenyl
12. L50: C8
13. L60: C4

مشاهده
آنالیز روغن های روان کننده با دستگاه ICP-OES با دقت بالا

توجه داشته باشید که این نام‌ها به ترتیب محبوبیت و انتشار در بازار هستند و برای نوع ویژگی‌های ستون‌های جداسازی مطابق با مشخصات USP L طراحی شده‌اند.

نتیجه:
نوع ستون جداسازی مورد استفاده بستگی به نوع ترکیبات شیمیایی در نمونه دارد و هدف نهایی از تحلیل برای چه منظوری استفاده خواهد شد. مثلاً، برای تحلیل داروهای ترکیبی می‌توان از ستون‌های C18 یا C8 استفاده کرد، در حالی که برای تحلیل اسیدها و بازهای آلی می‌توان از ستون‌های C18 استفاده کرد. همچنین، برای تحلیل ترکیبات با بار الکتریکی مانند یون‌ها و ترکیبات شیمیایی با بار الکتریکی می‌توان از ستون‌های Ion exchange استفاده کرد. نوع ستون جداسازی در HPLC باید با توجه به نوع نمونه و هدف نهایی تحلیل انتخاب شود.